柳州戴氏教育補(bǔ)習(xí)書(shū)法生費(fèi)用，柳州戴氏教育怎么樣

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在江濱公園那邊 挺不錯(cuò)的 我有個(gè)同學(xué)，鐵一中的，高三晚課全日制在那里上課，這次一摸英語(yǔ)考了128，剛剛?cè)サ臅r(shí)候英語(yǔ)95分左右，語(yǔ)文也漲了二十幾分，全科提高了大概60幾分左右。感覺(jué)還不錯(cuò) 就是費(fèi)用有點(diǎn)點(diǎn)偏高，其他聽(tīng)同學(xué)講都很好，后來(lái)他就沒(méi)有去戴氏了

電泳后，核酸需經(jīng)染色才能顯色出帶型，常用以下核酸染色劑：

1、溴化乙錠（ethidiumbromide，EB）最常用的核酸熒光染料，可嵌入核酸雙鏈的配對(duì)堿基之間，在紫外線激發(fā)下，發(fā)出桔紅色熒光。EB-DNA復(fù)合物中的EB發(fā)出的熒光，比游離的凝膠中的EB發(fā)出的熒光強(qiáng)度大10倍，因此無(wú)需洗凈背景即可清楚觀察核酸帶型。若EB背景太深，可將凝膠浸泡于1mmol/LMgSO4中1h或10mmol/LMgCl2中5min，使非結(jié)合的EB褪色，這樣可檢查到10ng的DNA樣品，EB也可用于檢測(cè)單鏈DNA或RNA，但其對(duì)單鏈核酸的親和力相對(duì)較小，熒光產(chǎn)率也相對(duì)較低。在凝膠或電泳緩沖液中加入終濃度為0。5μg/ml的EB，染色可在電泳過(guò)程中進(jìn)行，能隨時(shí)觀察核酸的遷移情況。但EB帶正電荷，嵌入堿基后增加了核酸分子的剛性，使遷移率減慢，故不宜用于測(cè)定核酸分子量的大小，這時(shí)應(yīng)在電泳后將凝膠浸入0。5μg/ml的EB水溶液中10min進(jìn)行染色。EB見(jiàn)光易分解，應(yīng)于4℃避光保存

2、吖啶橙（acridineorange，AO）：吖啶橙可嵌入雙鏈核酸堿基對(duì)之間，在254nm紫外線激發(fā)下發(fā)出530nm的綠色熒光；還通過(guò)靜電與單鏈核酸的磷酸基結(jié)合，在254nm紫外線激發(fā)下產(chǎn)生640nm的紅色熒光。因此可區(qū)分單鏈和雙鏈核酸，靈敏度分別為0。1μg和0。05μg。但吖啶橙的染色操作要求嚴(yán)格，應(yīng)在22℃，0。01mol/L磷酸鈉緩沖液（pH7。0）中避光浸泡30min，然后在搪瓷盤中用該緩沖劑4℃脫色過(guò)夜或22℃脫色1~2小時(shí)

3、銀（Ag+）試劑：Ag+與核酸形成穩(wěn)定復(fù)合物，然后用甲醛使Ag+還原成銀顆粒。AgNO3等試劑可使聚丙烯酰胺凝膠上的單鏈，雙鏈DNA及RNA都染成黑褐色。銀染法的靈敏度比EB染色高200倍左右，比亞甲藍(lán)染色高100~1000倍，在小于0。5mm厚的凝膠中，能檢測(cè)出0。5ng的RNA，其缺點(diǎn)是專一性不強(qiáng)，能與蛋白質(zhì)，去污劑反應(yīng)也產(chǎn)生褐色，而且對(duì)DNA的染色定量不準(zhǔn)確。銀與DNA穩(wěn)北流合，對(duì)DNA有破壞作用，不適于DNA片段回收的制備

4、亞甲藍(lán)（methyleneblue）可將RNA染成藍(lán)色，但靈敏度不高，而且操作時(shí)間長(zhǎng)。染色過(guò)程：膠浸泡于0。02%的亞甲藍(lán)，10mmol/LTris-Ac(pH8。3)，4℃放置1~2h，用凈水洗5~8h（反復(fù)換水），帶型肉眼可見(jiàn)，最低檢測(cè)量為250ng