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高氏1號培養(yǎng)基 和牛肉膏蛋白胨的特點各是什么？

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高氏1號培養(yǎng)基是分離和培養(yǎng)放線菌的合成培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基是由可溶性淀粉（作為碳源），KNO3（作為氮源），NaCl、K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H2O（作為無機鹽，為微生物提供鈉、鉀、磷、鎂、硫等離子）和FeSO4· 7H2O（作為微生物的微量元素，提供鐵離子）等組成。由于磷酸鹽和鎂鹽相混合時產(chǎn)生沉淀，因此，在混合培養(yǎng)基成分時，一般是按配方的順序依次溶解各成分。對于象FeSO4·7H2O這樣的微量成分，則可預(yù)先配成高濃度的貯備液，在配制培養(yǎng)基時按需要加入一定的量。高氏1號培養(yǎng)基配方如下： 可溶性淀粉 20g NaCl 0.5g KNO3 1g K2HPO4·3H2O 0.5g MgSO4· 7H2O 0.5g FeSO4·7H2O 0.01g 瓊脂 15—20g 水 1000ml pH 7.4—7.6

三、器材 可溶性淀粉，KNO3,NaCl,K2HPO4·3H2O,MgSO4·7H2O, FeSO4·7H2O，瓊脂， 1mol/L NaOH, 1mol/ LHCl； 試管，三角燒瓶，燒杯，量筒，玻棒，培養(yǎng)基分裝器，扭力天平，牛角匙，高壓蒸汽滅菌鍋，pH試紙（pH5.5—9.0），棉花，牛皮紙，記號筆，麻繩，紗布等。

四、操作步驟 1.稱量和溶化 按配方先稱取可溶性淀粉，放入小燒杯中，并用少量冷水將淀粉調(diào)成糊狀，再加入少于所需水量的沸水中，繼續(xù)加熱，使可溶性淀粉完全溶化。再稱取其他各成分依次逐一溶化。對微量成分FeSO4·7H2O可先配成高濃度的貯備液后再加入，方法是先在100ml水中加入1g的FeSO4·7H2O配成0.01g/ml，再在1000ml培養(yǎng)基中加入1ml的0.01g/ml的貯備液即可。待所有藥品完全溶解后，補充水分到所需的總體積。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用最廣泛和最普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，有時又稱為普通培養(yǎng)基。它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。其中牛肉膏為微生物提供碳源和能源，磷酸鹽、蛋白胨主要提供氮源，而NaCl提供無機鹽。在配制固體培養(yǎng)基時還要加入一定量瓊脂作凝固劑。瓊脂在常用濃度下96℃時溶化，一般實際應(yīng)用時在沸水浴中或下面墊以石棉網(wǎng)煮沸溶化，以免瓊脂燒焦。瓊脂在40℃時凝固，通常不被微生物分解利用。固體培養(yǎng)基中瓊脂的含量根據(jù)瓊脂的質(zhì)量和氣溫的不同而有所不同。由于這種培養(yǎng)基多用于培養(yǎng)細(xì)菌，因此，要用稀酸或稀堿將其pH調(diào)至中性或微堿性，以利于細(xì)菌的生長繁殖。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配方如下： 牛肉膏 3g 蛋白胨 10g NaCl 5g 瓊脂 15—20g 水 1000ml pH 7.4—7.6

三、器材 牛肉膏，蛋白胨， NaCl，瓊脂； 1mol/L NaOH, 1mol/L HCl； 試管，三角燒瓶，燒杯，量筒，玻棒，培養(yǎng)基分裝器，扭力天平，牛角匙，高壓蒸汽滅菌鍋，pH試紙（ pH 5.5—9.0），棉花，牛皮紙，記號筆，麻繩，紗布等。

四、操作步驟 1.稱量 按培養(yǎng)基配方比例依次準(zhǔn)確地稱取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入燒杯中。牛肉膏常用玻棒挑取，放在小燒杯或表面皿中稱量，用熱水溶化后倒入燒杯。也可放在稱量紙上，稱量后直接放入水中，這時如稍微加熱，牛肉膏便會與稱量紙分離，然后立即取出紙片。蛋白胨很易吸潮，在稱取時動作要迅速。另外，稱藥品時嚴(yán)防藥品混雜，一把牛角匙用于一種藥品，或稱取一種藥品后，洗凈、擦干，再稱取另一藥品，瓶蓋也不要蓋錯。2.溶化 在上述燒杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒攪勻，然后，在石棉網(wǎng)上加熱使其溶解。待藥品完全溶解后，補充水分到所需的總體積。如果配制固體培養(yǎng)基，將稱好的瓊脂放入已溶化的藥品中，再加熱溶化，在瓊脂溶化的過程中，需不斷攪拌，以防瓊脂糊底使燒杯破裂。最后補足所失的水分。3.調(diào)pH 在未調(diào)pH前，先用精密pH試紙測量培養(yǎng)基的原始pH值，如果pH偏酸，用滴管向培養(yǎng)基中逐滴加入1mol/L NaOH，邊加邊攪拌，并隨時用pH試紙測其pH值，直至pH達7.6。反之，則用1mol/L HCl進行調(diào)節(jié)。注意pH值不要調(diào)過頭，以避免回調(diào)，否則，將會影響培養(yǎng)基內(nèi)各離子的濃度。對于有些要求pH值較精確的微生物，其pH的調(diào)節(jié)可用酸度計進行（使用方法，可參考有關(guān)說明書）。4.過濾 趁熱用濾紙或多層紗布過濾，以利結(jié)果的觀察。一般無特殊要求的情況下，這一步可以省去（本實驗無需過濾）。5.分裝 按實驗要求，可將配制的培養(yǎng)基分裝入試管內(nèi)或三角燒瓶內(nèi)。分裝裝置見圖Ⅴ-1。分裝過程中注意不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。

（1）液體分裝分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。

（2）固體分裝分裝試管，其裝量不超過管高的1/5，滅菌后制成斜面，如圖Ⅴ-2。分裝三角燒瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。

（3）半固體分裝試管一般以試管高度的1/3為宜，滅菌后垂直待凝。6.加塞 培養(yǎng)基分裝完畢后，在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物進入培養(yǎng)基內(nèi)而造成污染，并保證有良好的通氣性能（棉塞制作方法附本實驗后面）。7.包扎 加塞后，將全部試管用麻繩捆扎好，再在棉塞外包一層牛皮紙，以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞，其外再用一道麻繩扎好。用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、組別、日期。三角燒瓶加塞后，外包牛皮紙，用麻繩以活結(jié)形式扎好，使用時容易解開，同樣用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、組別、日期。8.滅菌 將上述培養(yǎng)基以1.05kg/cm2(15磅/英寸2),121.3℃， 20分鐘高壓蒸